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多聚磷酸對(duì)GFP相態(tài)轉(zhuǎn)變的影響,首 先，分別觀測(cè)了LB培養(yǎng)基中表達(dá)了GFP的細(xì)菌與SMW培養(yǎng)基（低養(yǎng)分培養(yǎng)基）中細(xì)菌表達(dá)的GFP的狀態(tài)。多聚磷酸廠家,多聚磷酸價(jià)格。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，LB培養(yǎng)基中的細(xì)菌GFP均勻分散在菌體中，而SMW培養(yǎng)基中的細(xì)菌蛋白發(fā)生了明顯的相分離，蛋白分別聚集于菌體的兩端。由于兩種培養(yǎng)基中細(xì)菌內(nèi)多聚磷酸含量具有差異，因此設(shè)想這種相分離的發(fā)生與細(xì)菌內(nèi)部的多聚磷酸有關(guān)。

接下來(lái)，利用陽(yáng)離子染料DAPI對(duì)細(xì)菌內(nèi)部的多聚磷酸進(jìn)行染色，發(fā)現(xiàn)在發(fā)生相分離的細(xì)菌體中，GFP的綠色熒光點(diǎn)與多聚磷酸包裹的DAPI形成的黃色點(diǎn)發(fā)生重合，這則初步證實(shí)了多聚磷酸與蛋白的相互作用誘發(fā)了這種相分離行為。
動(dòng)態(tài)過(guò)程顯示，綠色熒光蛋白在濃度逐漸增高的多聚磷酸的作用下逐漸發(fā)生聚集，最后在30分鐘時(shí)在細(xì)菌的兩端形成蛋白微液滴結(jié)構(gòu)。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)逐漸調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中的養(yǎng)分濃度來(lái)控制細(xì)菌內(nèi)的多聚磷酸含量，結(jié)果在60分鐘時(shí)，GFP依舊發(fā)生了聚集。而反過(guò)來(lái)，逐漸提高培養(yǎng)基中的養(yǎng)分，原本聚集的GFP又分散開(kāi)來(lái)。以上現(xiàn)象充分證明了多聚磷酸對(duì)GFP的相分離起到了重要作用。

多聚磷酸含量對(duì)蛋白聚集的影響
隨后，在菌體外進(jìn)行了液-液相分離機(jī)理的研究。首 先，發(fā)現(xiàn)未加入多聚磷酸的GFP溶液始終是澄清的，而加入了多聚磷酸的GFP溶液隨時(shí)間推移發(fā)生渾濁，顯微鏡下可以明顯觀測(cè)到在該溶液中存在蛋白小液滴。以此現(xiàn)象為基礎(chǔ)，通過(guò)調(diào)節(jié)多聚磷酸的鏈長(zhǎng)以及陰陽(yáng)離子的比例(R-/+)來(lái)對(duì)多聚磷酸與蛋白的相互作用機(jī)理進(jìn)行評(píng)估。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，多聚磷酸的存在對(duì)蛋白的相分離有明顯的促進(jìn)作用；并且隨著多聚磷酸鏈長(zhǎng)的增加，蛋白相分離的驅(qū)動(dòng)力變大，越容易發(fā)生蛋白的液-液相分離；與此同時(shí)，電荷比對(duì)相分離現(xiàn)象也有明顯的影響，R-/+越大，形成的液滴越大，即越容易發(fā)生相分離。

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